【摘 要】
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目的本实验成功建立了能够定量检测人前列腺癌细胞转移能力的鸡胚尿囊膜转移模型,并在此基础上,定量检测并证实了人前列腺癌转移相关短肽对PC3M细胞转移的抑制作用。方法人前
【机 构】
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吉林大学病理生物学教育部重点实验室;
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目的本实验成功建立了能够定量检测人前列腺癌细胞转移能力的鸡胚尿囊膜转移模型,并在此基础上,定量检测并证实了人前列腺癌转移相关短肽对PC3M细胞转移的抑制作用。方法人前列腺癌转移相关短肽的扩增;人前列腺癌鸡胚绒毛尿囊膜肿瘤转移模型的建立;免疫组织化学染色验证肿瘤细胞的转移;利用实时荧光定量PCR扩增人特有的Alu序列,通过标准曲线得到转移到lower CAM的PC3M细胞数。实时PCR检测不同时间的转移情况,扩增产物经2%凝胶电泳分析。结果 ;免疫组织化学染色的结果证实了前列腺癌细胞PC3M在人前列腺癌鸡胚尿囊膜肿瘤转移模型中成功转移至lower CAM。A1u序列扩增成功,表明肿瘤细胞确实由接种部位侵入血管后转移到lower CAM,而并非经过某些孔隙泄漏而至。从12小时到36小时转移的细胞数由几十增至1000,提示此时间段转移的细胞数可接近最佳检测数量级:100,而接种48小时后转移细胞量显著增高,表明肿瘤细胞转移的时间依赖性。接种5×10~5~1×10~6个细胞,24小时后可检测到100数量级的转移细胞,表明肿瘤细胞转移的浓度依赖性。只有将PC3M细胞和短肽于接种前共孵育结合,发生转移的肿瘤细胞才会减少,且具有统计学意义,抑制率为23.41%,结论:实验结果表明:利用定量检测人前列腺癌细胞转移能力的鸡胚绒毛尿囊膜肿瘤模型,序列为CGWTPVI的人前列腺癌转移相关短肽能够抑制前列腺癌细胞PC3M的转移。此特异性短肽对前列腺癌细胞转移的抑制作用与其跟前列腺癌细胞的结合方式有关。
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