【摘 要】
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卵泡闭锁主要由颗粒细胞凋亡所引起,但其具体机制仍不清楚。PARP-1的解离参与多种生理和病理过程,但其参与卵泡闭锁的作用机制未见报道,我们的研究从体内和体外两个方面证实
【机 构】
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南京农业大学动物科技学院动物繁殖研究室;
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卵泡闭锁主要由颗粒细胞凋亡所引起,但其具体机制仍不清楚。PARP-1的解离参与多种生理和病理过程,但其参与卵泡闭锁的作用机制未见报道,我们的研究从体内和体外两个方面证实了PARP-1的解离参与了猪卵泡闭锁的过程。本研究结合雌二醇(E2)、孕激素(P4)的浓度以及P4/E2(P/E)比值和卵泡形态特征来确定卵泡健康状态,将卵泡分为将康(H),早期闭锁(EA)和晚期闭锁(PA)三个阶段。免疫组织化学(IHC)结果表明,解离的PARP-1主要定位于闭锁卵泡凋亡颗粒细胞的核中;而PARP-1和caspase-3主要定位于健康卵泡(H)的颗粒细胞中;免疫印迹(WB)的结果表明,与健康卵泡(H)相比,闭锁卵泡(EA、PA)中PARP-1的表达显着下降,而解离的caspase-3(17 kDa)表达量显著增加,同时,与健康卵泡(H)相比,闭锁卵泡(EA、PA)中解离的PARP-1(24 kDa)显著增加,这证实了caspase-3的活化参与了卵泡闭锁过程。为了进一步证实颗粒细胞凋亡在卵泡闭锁过程中的作用,我们通过无血清培养建立了猪颗粒细胞凋亡模型。在凋亡的颗粒细胞中,PARP-1表达显著降低,而解离的PARP-1(24kDa)和解离的caspase-3(17 kDa)显著增加,这与体内研究结果具有一致性,同时表明caspase-3在缺少营养物质的条件下被激活。总之,激活的caspase-3导致PARP-1解离,且上述过程引起了颗粒细胞的凋亡;PARP-1可能通过其解离过程参与调控猪卵泡的闭锁,由caspase-3引起的PARP-1的解离可能是调控颗粒细胞凋亡及卵孢闭锁的分子机制,因此,我们的发现有助于解释和探究卵泡发育及闭锁的调控机制,并可能为猪育种过程中提高母猪繁殖力及繁殖障碍治疗提供有价值的线索和依据。
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