源于嗜热菌的热稳定Ⅰ型内含子核酶的折叠和结构的初步研究

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噬热菌的发现给分子生物学研究带来了许多的突破,主要是因为它们的蛋白质,如 DNA 聚合酶,特别耐高温。虽然嗜热菌的蛋白质结构在过去受到极大的关注和深入的研究, 但是其 RNA 的结构和活性及稳定性并未得到很好的研究。Ⅰ型内含子是一类具有自剪接活性的内含子,所以被称为核酶。最近有文章报道生长温度处于50—95度的噬热细菌 Thermotoga neapolitanea 中的核糖体 RNA(rRNA)基因内含有一个Ⅰ型内含子,命名为 Tna.bL1931。该内含子在体外具有催化活性以及热稳定性。我们拟以 Tna.bL1931为模型研究热稳定核酶的折叠与结构。以前的研究表明温度和镁离子对 RNA 的折叠,结构和活性的有着重要的影响。本研究发现,在5mM Mg2+条件下,Tna.bL1931在小于70度具有活性, 而80度上没有活性,最佳温度小于50度。在大于15mM Mg2+条件下,Tna.bL1931在80度仍具有活性,最佳温度处于50—70度。该发现暗示该核酶的结构随着温度的升高而越来越不稳定,而高浓度镁离子的存咱稳定 RNA 结构。我们正在对该核酶在不同镁离子和温度下的结构进行检测,期望近期可以得到结果。
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