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刺参在不利环境因素刺激下会发生自溶现象,导致体壁出现白色斑块、溃烂最终融化成粘稠膏状物质,这一现象严重困扰着刺参养殖、储运和加工业的发展。本文通过对刺参自溶过程中细胞自噬mTOR关键信号通路的研究以揭示海参自溶机理,为抑制和激活刺参自溶的双向调控技术提供理论依据。刺参经紫外照射后迅速发生自溶,本文建立紫外照射后0 h、1 h、2 h、4 h、6 h的刺参自溶模型以探究刺参经紫外照射后的细胞自噬情况。本文采用MDC对体腔液细胞进行染色,并采用蛋白质免疫印迹法检测刺参肠组织胞内蛋白的表达,包括:LC3、Atg5、mTOR、PI3Kp110以及AKT。实验结果表明,由MDC染色的细胞结构逐渐由致密均匀变为大小不一的点状颗粒,这说明经紫外照射后刺参体腔液细胞发生了自噬。自噬标志性蛋白LC3的表达量在紫外照射后0 h,1 h时显著性增加,是新鲜组的3～5倍,2 h及以后表达量下降至新鲜组左右。自噬小体关键结合蛋白Atg5的表达量在紫外照射后0h,1h显著增加至新鲜组2倍左右,2 h后下降至新鲜组以下。以上结果表明紫外照射诱导了刺参细胞发生自噬,且在2h后自噬进程减慢。对mTOR,PI3Kp110,AKT的表达量的研究结果发现,mTOR在Oh,1 h组表达量显著增加,在2 h后下降至新鲜组以下;PI3K p110在Oh,1h组检测到明显表达,而新鲜组及2h后未有检出;AKT在Oh组表达量显著增加,在1 h后降低至新鲜组左右。三者作为自噬mTOR信号通路关键性蛋白,其在紫外照射后0 h,1 h表达量均有显著增加,2 h后其表达量均下降且无较大变化,与自噬标志性蛋白LC3,Atg5表达情况变化趋势相同。这一结果表明紫外照射后刺参的mTOR信号通路可能被抑制。综上结果表明紫外照射诱导了刺参细胞自噬,且可能与mTOR信号通路密切相关。本研究表明自噬现象参与了刺参的自溶起始过程,且可能与mTOR信号通路相关,但在此之后自噬现象发生停滞,目前仍不清楚自噬是否是导致刺参自溶的主导因素。