目的:研究同时携带人apoAI和SR-BI双基因的2型重组腺相关病毒载体在人肝癌细胞系（HepG2cells）中的表达,进一步观察该双基因在该细胞中共表达对胆固醇逆向转运的影响。方法:提取人胎肝组织RNA,逆转录为cDNA,设计含特定酶切位点的基因特异性引物,通过PCR方法分别得到人apoAI和SRBI两个目的基因片段,经由T载体,最终构建到AAV2载体质粒中去。三质粒共转染293细胞包装,硫酸肝素琼脂糖纯化及点杂交检测病毒滴度,获得高滴度高纯度的rAAV2-apoAI-IRES-SR-BI。通过体外转染hepG2细胞,检测病毒的活力及转染效率。应用RT-PCR检测转染后HepG2 cells中人apoAI和SR-BI mRNA表达的上调情况,Western-blot检测人apoAI和SR-BI蛋白的表达情况。并采用HPLC检测转染后的HepG2cells在受到氧化低密度脂蛋白刺激后细胞内胆固醇的含量,观察目的基因在体外细胞实验中共表达逆向转运胆固醇的作用效果。结果:双基因表达载体构建成功,病毒包装效率稳定,纯度较好,滴度达到了1.12×10⁽（11）vg/mL,成功转染并且在肝癌细胞系中得到了表达,RT-PCR检测结果显示目的基因apoAI与SRBI在mRNA水平表达上调,Western-blot检测显示目的基因apoAI与SR-BI在蛋白水平表达升高。转染双基因HepG2 cells的胞内胆固醇含量低于单独转染一个apoAI基因的水平。结论:含有目的基因的AAV2载体在肝癌细胞系中得到了表达,双基因在胆固醇逆向转运过程中发挥了协同作用,优于其中单独apoAI一个基因的转运能力,即在胆固醇转运能力方面发挥了协同作用,为进一步体内实验奠定了可行性基础。