2012年,我们在中国养殖场的一批患早期死亡综合征/急性肝胰腺坏死症的中国明对虾中发现了一株黄头病毒(YHV)新株型,拟命名为YHV-8。本文建立了一种实时荧光一步RT-LAMP方法,此方法可以很好的用于检测YHV-1和YHV-8。本研究基于黄头病毒基因组的一段保守序列设计了6条特异性引物。优化后的LAMP体系中,包含8mM的Mg2+和1.5mM的d NTPs,在58℃反应60分钟。这个RT-LAMP方法的检测灵敏度能够达到7拷贝/反应。为检测本方法的特异性,我们用其测试了患TSV,WSSV,IHHNV,HPV和SPF对虾组织的总RNA,显示无非特异性反应存在。标准曲线表现出很高的相关系数,表明本方法适合于进行定量研究。本实验还运用新建立的RT-LAMP方法,对几批养殖对虾样品进行了检测。结果表明,111份凡纳滨对虾样品中,有3份阳性。8份中国明对虾样品中,有6份阳性。19份罗氏沼虾样品中,有5份阳性。9份日本对虾样品均未阴性。本研究表明,新建立的r RT-LAMP方法适合于快速灵敏的检测黄头病毒。