肌球蛋白轻链激酶（MLCK）在有Ca²⁺与钙调蛋白(Ca²⁺/CaM)存在的情况下磷酸化肌球蛋白20KD调节轻链,从而使肌球蛋白与肌动蛋白之间相互作用。此外,MLCK还具有非激酶活性,在用肌球蛋白包被的盖玻片上我们观察到MLCK可以抑制ATP依赖的肌动蛋白丝的运动。本实验中我们通过对MLCK的CaM结合位点进行定点突变使其失去激酶活性,获得的重组MLCK称之为△CaM/MLCK,并利用大肠杆菌表达系统成功地进行了大量表达。检测了重组△CaM/MLCK突变体对肌球蛋白的Mg²⁺-ATP酶活性的影响,又通过体外结合实验检测了Ca²⁺/CaM对重组MLCK与肌动蛋白结合活性的影响,我们还通过体外肌丝运动实验（in vitro motility assay）检测了重组MLCK对肌动蛋白丝运动速度的影响。结果表明:△CaM/MLCK具有在无Ca²⁺/CaM条件下,激活非磷酸化肌球蛋白的Mg²⁺-ATP酶活性,抑制磷酸化肌球蛋白的Mg²⁺-ATP酶活性;结合实验结果显示,重组野生型MLCK（WT/MLCK）和△CaM/MLCK都具有与肌动蛋白结合的活性,Ca²⁺/CaM可以部分抑制WT/MLCK与肌动蛋白的结合（p<0.05）,却对△CaM/MLCK与肌动蛋白的结合没有明显的抑制作用;体外肌丝运动实验结果显示,在无Ca²⁺/CaM条件下,WT/MLCK和△CaM/MLCK都具有抑制肌动蛋白丝的运动（p<0.01）,在有Ca²⁺/CaM条件下,随着WT/MLCK浓度的增加对肌动蛋白丝的运动并没有抑制作用,而△CaM/MLCK却有明显的抑制作用（p<0.01）。以上结果显示,MLCK的非激酶活性在平滑肌的收缩过程中起着非常重要的作用。