受体免标记近红外FRET传感器设计及其生物分析应用

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荧光共振能量转移(FRET)是一种将荧光光谱与共振能量转移相结合的高灵敏,高空间分辨率,无损伤的均相分析技术。其能量转移效率与供受体之间距离R的六次方成反比,因此,FRET常被称为1.0-10.0nm范围内有效的光学"分子尺",[1]但是,作为一种光谱技术,FRET由于生物基质本底荧光,散射光和光吸收等干扰,其应用于血样分析时灵敏度大为降低;[2,3]此外,FRET受体通常需要繁琐的生物修饰或标记步骤。[4,5]以胰岛素为分析对象,我们设计了基于NIR-QDs修饰的核酸适配体(aptamer)为供体,无机猝灭材料(OCNPs)为免标记受体的FRET新方法(Scheme 1)。其以近红外750 nm为检测窗口,极大地消除生物样本的光学干扰,提高信噪比;利用aptamer与纳米受体的π-π相互作用实现供受体自组装,[6]避免近红外有机染料或纳米金棒作为近红外FRET受体时的生物标记或表面修饰等不足。该传感器对胰岛素具有很好的选择性,线性范围宽(1 pM~2.0 nM),灵敏度高达0.6 pM,能够直接应用于临床血样中胰岛素含量测定。
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