节瓜抗枯萎病相关基因的表达分析

被引量 : 0次 | 上传用户:qinslin5043
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的一种土传真菌病害,已成为节瓜(Benincasa hispida var. chieh-qua)生长过程中最具破坏性的病害之一,且发病趋势日益加剧。对节瓜枯萎病抗性进行转录组测序和相关基因的表达分析,有助于了解节瓜抗枯萎病的分子机理,也为节瓜抗病性遗传改良和分子辅助育种提供理论参考。以抗枯萎病节瓜纯合自交系A39与高感枯萎病纯合自交系H5(5号黑毛节)为材料,用外源镰刀菌酸(FA)在苗期对进行胁迫处理;硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量;NBT光化还原法测定超氧化物酶(SOD)活性;应用TUNEL方法检测处理后细胞凋亡情况;分别在正常条件下和FA处理后2 d,选取A39和H5的叶片,构建cDNA文库并进行Illumina RNA-seq测序,获得差异基因;利用GO和KEGG对差异基因进行富集分析;利用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对抗枯萎病相关的基因进行验证。结果表明,FA胁迫处理后,H5的叶片比A39早发黄萎蔫,且H5叶片的MDA含量升高,而SOD酶活性下降。进一步通过TUNEL实验观察到,处理前,两份材料的TUNEL的阳性信号几乎检测不到,但是FA处理后H5的TUNEL的阳性信号较A39强烈,且数目较多,说明FA处理后大部分H5叶片的DNA发生片段化,大部分细胞死亡。转录组测序结果显示,FA胁迫时,A39和H5差异基因(DEGs)数目比正常条件下显著增加,其中2243个基因发生上调,1688个基因的表达量下调。DEGs根据GO分析可以分为生物过程,细胞组分和分子功能3类;KEGG分析显示,FA胁迫处理后的差异基因主要富集在植物—病菌互作途径,嘌呤代谢途径,剪接体相关的途径等。进一步采用qRT-PCR分析发现,病菌相关基因,WRKY类转录因子以及内切几丁质酶类相关基因的表达量变化与转录组分析的结果一致,且在FA处理后发生了显著上调或下调,有可能与节瓜枯萎病的抗性调控相关。本研究从生理生化和分子水平研究节瓜枯萎病抗性的机制,为克隆和分离相关抗性基因,提高节瓜的枯萎病抗性育种奠定了理论基础,也为节瓜育种的遗传改良和枯萎病抗性的分子机制研究提供了一定的生理生化和分子理论依据。
其他文献
<正>自弗洛伊德于1910年提出反移情这个概念后,反移情在各个方面引起了研究者的关注。反移情广泛地存在于治疗过程中,对反移情进行研究具有非常重要的理论及实践意义。本文首
近年来,随着国家工业化和城市化的快速推进,工业生产和日常生活中污水的排放急剧增加,未经处理的含油废水会给当地自然水体带来严重威胁,进而通过食物链影响人类的生活质量和
目的:探讨芪丹通脉片(QDTMT)对大鼠海马局部梗死的影响和机制.方法:雄性SD大鼠72只,随机分为6组(n=12),即空白对照组、假手术组、缺血组、QDTMT高剂量组(QDTMTH),QDTMT中剂量组(QDTMTM),QDTM
仲秋的夜色来得有点早,6点钟光景,在宝安中心区的食肆纷纷已华灯初上。坐在一问水吧的沙发上.阿平的回忆慵懒而低沉。阿平回想几年前的自己,一个国内211大学的优秀毕业生,曾在国内
在手征SU (3)夸克模型和推广的手征SU (3)夸克模型下,利用共振群方法研究了奇异数为-6的双重子ΩΩ的结构。分析了波函数宽度,夸克交换效应以及标量介子混合角对系统结合能的影响。
<正>目前论文考虑较多的是齿轮间隙,时变啮合刚度和裂纹,而对摩擦的考虑少。本文在考虑摩擦的情况下,对齿轮裂纹故障的非线性动力学行为进行了研究,讨论裂纹对齿轮轮齿综合啮
市场对冬瓜大小和长度的需求不尽一致,培育符合不同市场需求的品种是冬瓜育种目标之一,而确定影响冬瓜大小和长度的相关因素可有效提高育种效率。本研究中对冬瓜子房长、子房
海战场的目标识别是敌我判断、精确跟踪以及准确打击的前提,在现代海战中起着至关重要的作用。针对舰船编队场景下的海战场典型目标的识别问题,提出了一种基于卷积神经网络的协