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目的使用猪肺炎支原体脂膜蛋白LAMPs作用于猪肺泡上皮细胞(SJPL),检测LAMPs是否为猪肺炎支原体的致病因素。材料与方法使用KM2培养基培养猪肺炎支原体232株(ATCC 27714)。通过TBSE和Triton-114提取猪肺炎支原体的脂膜蛋白LAMPs用于研究。实验用细胞为猪气管上皮细胞SJPL,DMEM培养后接种96孔细胞板待用。研究中先使用MTT法检测不同浓度LAMPs对细胞的生长抑制作用,随后使用DAPI,AO/EB双染及末端羟基标记TUNEL法检测细胞凋亡的形态学变化。通过流式细胞仪检测LAMPs诱导细胞的凋亡率。通过caspase3,caspase8酶活性检测以及Western Blot法检测凋亡通路相关信号蛋白PARP,Bax和p38 MAPK。同时检测了炎性因子NO及超氧化物的浓度。结果与讨论经过MTT法检测IAMPs对细胞的毒性作用,选定0.2mg/mL为研究作用浓度。在LAMPs与SJPL细胞相互作用24h后出现了典型的细胞凋亡现象。细胞核出现核固缩,碎裂,皱缩为不规格的形状,并出现凋亡小体,同时由于基因组断裂而暴露的3’-OH被TUNEL标记为绿色荧光。在AO/EB双染中出现橙黄色凋亡细胞。使用流式细胞仪检测LAMPs作用于细胞24后出现36.5%±11.6%的凋亡率。在LAMPs作用于SJPL细胞6h时,caspase 3的酶活性与阴性细胞相比升高了40倍,caspase 8的酶活性提升了4倍。在凋亡通路的检测中,PARP被切割为两个较小的片段被活化,p38 MAPK被磷酸化,促凋亡蛋白Bax表达增加的同时,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下调,Cyt c从线粒体释放到细胞质中被激活。此外,LAMPs还可以刺激细胞产生NO和超氧化物。结论猪肺炎支原体的脂膜蛋白LAMPs具有诱导猪肺泡上皮细胞SJPL凋亡的能力,其中激活了caspas3,caspase8,PARR,p38 MAPK,Bax及细胞色素Cytc。这项研究可以帮助我们进一步认识猪肺炎支原体的治病机制,对LAMPs诱导细胞凋亡途径更深入的研究将有助于确立猪肺炎支原体感染的治疗靶标。