【摘 要】
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目的探究硒蛋白K(selk)基因沉默对小鼠巨噬细胞增殖、吞噬和迁移的影响,阐明selk对预防手足口等病毒性疾病感染的免疫效应机制。方法制作并包装小鼠巨噬细胞selk慢病毒干扰株
【机 构】
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深圳大学生命科学学院; 深圳市疾病预防控制中心; 深圳市龙岗区坪地预防保健所; 汕头大学医学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81273075);深圳市科技技术开发(cxzz4816)
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目的探究硒蛋白K(selk)基因沉默对小鼠巨噬细胞增殖、吞噬和迁移的影响,阐明selk对预防手足口等病毒性疾病感染的免疫效应机制。方法制作并包装小鼠巨噬细胞selk慢病毒干扰株,将细胞分为未转染巨噬细胞(Mφ)、空载体慢病毒转染巨噬细胞(Mφ-NC)和selk慢病毒干扰巨噬细胞(Mφ-RNAi)。建立稳定干扰的巨噬细胞株后,实时定量RT-PCR法和蛋白质免疫印迹法检测selk的干扰效率,CCK8法检测细胞增殖,巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测其吞噬能力和Transwell法检测细胞迁移能力。结果与Mφ-NC组相比,Mφ-RNAi株巨噬细胞selk的mRNA和蛋白质水平显著降低(p<0.05),48 h后,与Mφ-NC组相比,Mφ-RNAi组巨噬细胞的增殖受到了明显的抑制(P<0.01),同时Mφ-RNAi组巨噬细胞穿过小室的细胞数显著低于Mφ-NC组(P<0.05),能吞噬鸡红细胞的Mφ-RNAi组巨噬细胞数量显著较少。结论 selk基因沉默使小鼠巨噬细胞的增殖、吞噬和迁移能力降低,从而改变其抗感染免疫能力。
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