鳗鲡肝肾肿大及体表溃烂症病原菌的分离与鉴定

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2008年3月从广东虎门患病鳗鲡肾脏分离到两株优势菌GHAn0803-1和GHAn0803-2。患病鳗鲡体表有大量出血点,鳍条充血,有些体表溃烂,肝脏部位皮肤甚至溃烂穿孔,肛门红肿,挤压腹部有红色粘液流出,解剖检查,肝、肾肿大,胃肠明显充血。通过常规细菌学方法和应用ATB细菌自动鉴定仪,GHAn0803-1和GHAn0803-2分别与迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella trade)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus)生化谱接近。为了进一步确定其分类地位,测定了GHAn0803-1的16S rRNA基因序列和GHAn0803-2的HSP60基因部分序列。PCR扩增16S rRNA获得1431bp的基因片段,与迟钝爱德华氏菌(AB050832)的16S rRNA基因同源性达99.7%,16S rRNA基因构建的系统进化树表明,菌株GHAn0803-1与Edwardsiella trade聚类;PCR扩增HSP60获得505bp的基因片段,与创伤弧菌(BA000037)的同源性达99.8%,HSP60基因构建的系统进化树表明,菌株GHAn0803-2与Vibrio vulnificus聚类。综合上述结果,进一步鉴定GHAn0803-1和GHAn0803-2分别为迟钝爱德华氏菌和创伤弧菌。人工感染实验证明,GHAn0803-1和GHAn0803-2均具有致病性,对鳗鲡的半数致死量(LD50)分别为1.70×104CFU/g和2.41×106CFU/g,因此推断鳗鲡肝肾肿大及体表溃烂症为爱德华氏菌和创伤弧菌混合感染引起。国内外已有大量文献报道由迟钝爱德华氏菌引起鳗鲡肝肾病,创伤弧菌引起鳗鲡溃烂病也有报道,但尚未见由这两种菌混合感染引起鳗鲡发病的报道。
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