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目的 :DP4属于人转录因子DP家族成员,氨基酸序列与DP1相似性达到82%。DP4通过与DP1竞争结合E2F,形成异源二聚体,阻断E2F与DNA结合,从而抑制了E2F的转录激活活性。DP4还能抑制E2F1通过p53信号通路介导的细胞凋亡。本实验研究癌睾丸抗原DP4在肿瘤细胞受到DNA损伤刺激后,影响肿瘤细胞凋亡的机制。同时设计、寻找有效敲低细胞中DP4水平的si RNA。方法 :通过PCR技术、Western Blot技术及流式细胞技术检测筛选阳性表达DP4的乳腺癌细胞。将筛选出细胞系的进行放疗、化疗刺激,通过RT-PCR实验检测DP4基因表达变化;通过Western Blot技术检测细胞内DP4蛋白的表达变化;通过AV-PI双染,在流式细胞技术中检测两株细胞的凋亡水平。根据DP4的基因序列特点,设计有效的si RNA并转染,沉默细胞中DP4基因的表达。对转染后的细胞再次进行放、化疗刺激,检测DP4基因及蛋白的表达变化及细胞的凋亡情况。结果 :检测四株乳腺癌细胞株中DP4的表达,得到阳性表达DP4的乳腺癌细胞株MDA-MB-231及阴性表达DP4的乳腺癌细胞株SK-BR-3。对两株细胞进行伽马射线照射;表柔比星、依托泊苷等化疗药物刺激后,随照射剂量或药物浓度上升,MDA-MB-231细胞内DP4表达水平升高明显;SK-BR-3细胞内DP4表达水平略有上生,且SK-BR-3细胞更早出现凋亡。结论 :DP4在肿瘤细胞受到DNA损伤后,有抑制细胞凋亡的作用。