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目的热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)是一种广泛存在于各类细胞中的分子伴侣,HSP90有望成为嗜铬细胞瘤潜在的靶向治疗位点之一。本研究拟在体外探讨热休克蛋白90抑制剂Ganetespib对PC12细胞的生长影响及血管内皮生长因子VEGF的表达的调控。方法实验分为4组,分别为DMSO组(阴性对照组)、未处理组、空白对照组及Ganetespib组(实验组),实验组分别加入不同终浓度的Ganetespib的培液,每孔设5个复孔。应用噻唑蓝(MTT)比色法观察分别于使用Ganetespib处理12、24、36、48、60、72h后对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞的生长抑制作用;流式细胞学技术观察不同浓度Ganetespib处理细胞后的细胞周期变化;蛋白质免疫印迹法(Western blotting法)检测不同浓度Ganetespib处理细胞后HSP90、VEGF蛋白的表达变化。结果:实验组MTT法检测结果表明Ganetespib对PC12细胞具有明显的抑制增殖作用,在0.01μmol/L—0.1μmol/L浓度范围内呈现剂量-时间相关性,结果具有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪测不同浓度Ganetespib作用于细胞24h后细胞周期,结果显示0.2μmol/L浓度组G0/G1期细胞明显增加,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05),而0.01μmol/L、0.02μmol/L、0.1μmol/L组与对照组相比,其G0/G1期细胞并未明显增加,各组之间无统计学差异(P>0.05)。细胞迁移实验表明使用小剂量的Ganetespib作用于PC12细胞48h后,可明显抑制PC12细胞的远处迁移能力,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示使用小剂量的Ganetespib作用于细胞后24h,可使HSP90、VEGF蛋白表达明显减少,各组与未处理组相比均具有统计学意义(P<0.05)。结论 Ganetespib处理PC12细胞24h后,就可明显抑制VEGF表达,表明Ganetespib能够明显抑制VEGF表达;同时,本研究结果显示Ganetespib处理PC12细胞即可明显抑制肿瘤细胞生长及迁移能力,并且0.2μmol/L浓度的Ganetespib就可使PC12细胞明显阻滞于G0/G1期。鉴于Ganetespib对PC12细胞的增殖抑制、细胞周期阻滞、细胞迁移抑制及抑制VEGF表达,HSP90途径有望成为治疗恶性嗜铬细胞瘤的新靶点。