【摘 要】
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为筛选与O型FMDV衣壳酸敏感性相关的位点,通过突变相关酸敏感性位点以提高衣壳蛋白在Bac-toBac杆状病毒表达系统中的表达量。本研究以牛源O型FMDV ON株为研究对象开展耐酸性
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室;
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为筛选与O型FMDV衣壳酸敏感性相关的位点,通过突变相关酸敏感性位点以提高衣壳蛋白在Bac-toBac杆状病毒表达系统中的表达量。本研究以牛源O型FMDV ON株为研究对象开展耐酸性毒株的筛选工作,筛选得到存在于Pl上的5个错义突变位点。然后经过耐酸改造,利用杆状病毒表达系统获得表达O型FMDV衣壳蛋白的重组杆状病毒rBac-P12A3C。外源蛋白的表达检测结果表明,表达产物能够被O型FMDV多克隆抗体识别。免疫电镜观察到了直径约27nm的正六边形颗粒。用蛋白样品rBac-P12A3C对BALB/c小鼠肌肉注射免疫,通过液相阻断ELISA的方法检测O型口蹄疫病毒的抗体效价,最后取小鼠脾脏利用ELISPOT的方法检测细胞因子IL-4和IFN-γ的水平。结果表明蛋白样品rBac-P12A3C可以激发小鼠的体液免疫反应,同时还可以很好的激发小鼠的细胞免疫反应。本研究为后期研制出FMD的基因工程亚单位疫苗奠定了基础。
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