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目的:研究表明乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染是原发性肝细胞癌发生发展的主要原因,乙肝病毒X蛋白(Hepatitis B Virus X protein,HBx)在其中起主导作用。本研究旨在探讨HBx对Notch信号通路的调节以及Notch信号通路在乙肝相关性肝癌发生中的作用。方法:建立稳定转染HBx基因的HepG2细胞系(HepG2/HBx),进行裸鼠成瘤实验;用特异性的Notch信号通路阻断剂DAPT阻断该信号通路,检测转染前后及加入DAPT前后细胞的增殖、周期和凋亡,同时用实时定量PCR和Western Blot技术检测Notch通路成员的在mRNA及蛋白水平上的表达变化;并用免疫共沉淀法和荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察HBx与Notch通路成员的直接作用。结果:与转染空质粒的HepG2/pcDNA3.1细胞相比,接种HepG2/HBx细胞的肿瘤的增长明显增快;转染HBx基因后,HBx可促进细胞增殖及抑制细胞凋亡,同时通过与Notch的胞内段NICD的直接结合作用上调Notch通路成员的表达;应用10μM DAPT作用48h后,HepG2/HBx细胞Notch信号通路阻断,同时细胞增殖受到抑制及细胞凋亡增快。结论:HBx通过与Notch的胞内段NICD的直接结合作用激活Notch信号通路,促进肝细胞癌的发生发展。