Akt(v-akt murine thymoma viral oncogene)也被称为蛋白激酶B(protein kinase B,PKB),是一种分子量约为60 kDa的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。它处于多条信号通路的重要交叉点。可调节细胞因子、生长因子和癌基因Ras激活的细胞生存信号,在真核生物的调控网络中普遍存在。Akt由N端PH区(pleckstrin homology domains)、中央激酶区、C端调节区三部分组成。PI3K-Akt信号通路是胰岛素的主要下游分子通路,活化的Akt通过进一步磷酸化GSK-3(糖原合酶激酶-3)、FoxOs(叉头转录因子)、Caspase 9、mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)及P21等蛋白,介导胰岛素及多种生长因子诱发的细胞生长、增殖、细胞周期调节及糖代谢调节等。我国是猪种资源最丰富的国家,家猪在我国畜牧业中具重要地位,但家猪作为重要的经济动物在基础研究领域一直缺乏系列研究数据。已有的研究发现家猪众多基因在结构、mRNA的差别剪切机制、以及调控机制上有别于小鼠、人、牛等哺乳动物。有鉴于国际功能基因组研究的竞争趋势,积极发掘我国家猪基因资源,探究掌控猪系列经济性状的重要基因及其生理功能极为紧迫。Akt有三种亚型(Akt1,Akt2,Akt3),其在调节代谢、细胞增殖和凋亡中发挥着不同功能。Akt1基因敲除的小鼠新生儿死亡率明显提高,而且表现出轻度生长迟缓;Akt2基因敲除的小鼠则出现II型糖尿病特征;Akt1和Akt2基因双敲除小鼠由于严重的多器官发育障碍,在出生后不久即死亡。有鉴于Akt1,Akt2在哺乳动物发育中的重要作用,本研究以家猪为研究对象,探究Akt1,Akt2在家猪生长发育中的生理效应。本实验以长白猪肌肉为材料,提取RNA,反转录后以cDNA作为模板,采用特异性引物进行PCR扩增,分别获得Akt1、Akt2基因的cDNA全长,挑取阳性克隆进行序列测定。序列测定显示我们成功获得猪Akt1和Akt2基因cDNA全长。其中,Akt1基因cDNA全长为1461bp,编码480个氨基酸;Akt2基因cDNA全长为1505bp,编码481个氨基酸。与NCBI数据比对,Akt1与人的同源相似性达97%,小鼠达96%,斑马鱼达80%;Akt2与人的同源相似性达98%,小鼠达92%,斑马鱼达86%。本研究已将AKT1和AKT2的编码区序列克隆转入真核表达载体pcDNA3.1中,为后续功能鉴定奠定基础。