论文部分内容阅读
生防菌是植物病害防治中一类重要的生物资源,在农业生产中对一些重要病害,尤其是土传病害的防治起着重要作用,但作为活体使用的生防菌也面临着生防效果不够稳定药效作用缓慢的困扰。枯草芽孢杆菌B579是从天津近郊蔬菜种植区分离筛选获得1株细菌,经初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),试验表明该菌无论是室内平皿抑菌试验还是温室盆栽试验对土传病害表现出较好的防治效果且具有明显的促生作用,对黄瓜立枯病、猝倒病、枯萎病防效分别为71.8%、63.8%、73.7%,对黄瓜的促长率达到11.3%～13.9%,此外生防菌在土壤中的定殖情况是影响其生防效果的关键因素,揭示菌株的定殖规律成为目前研究的重点。影响生防菌定殖的因素很多,主要有残留在土壤中的农药、化肥;土壤中的微生物包括益生菌和病原菌;温度、湿度及不同的寄主植物等,本研究将排除以上外在因素,实时动态观察B579的自身定殖规律,首先将B579通过绿色荧光蛋白基因标记,构建了具有四环素抗性的B579-GFP工程菌株,用抗性平皿结合激光共聚焦显微镜对该菌在黄瓜根际定殖情况进行监测,试验设两个处理,处理一用浓度为10~3cfu/ml的B579进行土壤施入,处理二用同样浓度的B579浸泡黄瓜种子。30d的监测结果表明:处理一中黄瓜根际B579菌量最大,最高达到初始的3倍,最后稳定在初始浓度的2倍左右,处理二中黄瓜根际土壤中B579菌量较低,最终维持在10~2cfu/ml。将黄瓜根际的基质洗掉,在激光共聚焦显微镜下观察,可见绿色的菌体分布在黄瓜根部,形成一层保护膜,由此可见生防菌B579自身能够在黄瓜根际很好的定殖。