急性高眼压对大鼠血视网膜屏障的影响

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目的在高眼压条件下节细胞的存活除了受其自身特性影响外,还受该细胞所处的微环境的调节。而血视网膜屏障(BRB)对调节视网膜的微环境,维持其稳态起重要作用。本研究从视网膜的微环境入手探讨急性高眼压对大鼠血视网膜屏障的影响。方法伊文思蓝(EB)是一种荧光染料,3%的EB静脉注射后能在血液内与白蛋白结合,循环到各脏器,从毛细血管渗透到组织间。在正常视网膜,由于BRB的存在,血管中结合EB的白蛋白不能渗透到视网膜组织间隙,而血视网膜屏障破坏后,结合EB的白蛋白就能渗透到视网膜组织间隙中,因此,检测视网膜组织间隙中的EB含量,可反映BRB的破坏情况。本研究将正常SD大鼠42只,随机分为2个实验大组,每大组2 1只,实验组(n=1 8/G)做大鼠高眼压模型后存活3h,6h,1 2h,1d,3d,7d后大隐静脉注射0.15ml/100g的3%伊文思蓝和正常对照组(n=3/G)直接注射伊文思蓝。2小时后第一实验大组大鼠腹腔麻醉,37℃生理盐水灌注,取视网膜准确称重,甲酰胺提取视网膜中的伊文思蓝,用分光光度计比色定量每毫克视网膜中伊文思蓝的含量;第二实验大组大鼠腹腔麻醉,37℃生理盐水灌注,取视网膜在避光条件下进行铺片,共聚焦显微镜观察渗漏至组织间隙的红色荧光斑点。结果 EB定量实验结果显示急性高眼压后大鼠血视网膜屏障破坏3h时EB渗漏量最多,以后逐渐减少,7d时接近恢复正常。铺片共聚焦显微镜显示红色荧光斑点3h时最多,以后逐渐减少,7d时铺片上未见红色荧光斑点。结论急性高眼压后大鼠血视网膜屏障出现急性破坏,血视网膜屏障的通透性增加,然后逐渐恢复。血视网膜屏障的急性破坏导致视网膜微环境改变,可能参与了急性高眼压条件下视网膜节细胞损伤过程,其机制有待进一步研究。
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