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研究目的:Fbln7作为一种细胞外基质蛋白,在细胞粘附、颅颌面骨及牙齿发生、以及某些遗传性疾病的发生中发挥着重要作用,其mRNA在软骨中呈高表达。研究发现,在受精5d后的斑马鱼胚胎内敲除Fbln7,可引起先天性心脏病及鳃弓发育受损,颅颌面部的软骨发育受限,咽部的舌骨小角处软骨沉积异常等。课题组前期实验显示Fbln7在小鼠下颌骨髁突与膝关节软骨发育过程中随着软骨发育成熟而逐渐增加,且表达部位随着软骨发育的成熟逐渐向增殖层以及肥大层、钙化层迁移,蛋白的亚细胞定位倾向于胞膜和软骨基质中,提示Fbln7蛋白可能参与软骨细胞的分化与成熟等过程。本研究通过建立ATDC-5软骨向分化模型,研究Fbln7对于细胞软骨向分化能力的影响。研究方法:体外诱导ATDC-5细胞系向软骨分化,采用Realtime-PCR、Western blot检测方法检测Fbln7的表达规律。通过转染慢病毒建立Fbln7敲减及过表达细胞系,应用流式细胞术、CCK8细胞增殖活性检测、Realtime-PCR、Western blot,阿利新蓝及番红O染色法,研究Fbln7对ATDC-5细胞增殖、周期、凋亡以及软骨向分化能力的影响。研究结果:Fbln7在ATDC-5细胞系体外软骨向诱导分化中存在动态表达变化,降低Fbln7表达能够抑制ATDC-5细胞的增殖和凋亡,并且对ATDC-5细胞体外软骨向诱导分化具有抑制作用,而过表达Fbln7对ATDC-5细胞体外软骨向诱导分化具有促进作用。研究结论:Fbln7在软骨向分化诱导的作用下,具有动态表达变化,且在后期能够维持高表达的水平,提示Fbln7可能在软骨分化中发生作用。Fbln7具有能够促进ATDC-5细胞的增殖及凋亡,促进软骨向分化的能力,推测Fbln7可能主要对软骨细胞的肥大及成熟产生影响。