【摘 要】
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目的探讨miR-302a是否可以靶向抑制BCRP的表达逆转乳腺癌耐药;方法分别通过免疫组化、stemloop-RT PCR检测BCRP及miR-302a在乳腺癌组织中的表达;采用荧光素酶报告基因分析法
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81173092)
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目的探讨miR-302a是否可以靶向抑制BCRP的表达逆转乳腺癌耐药;方法分别通过免疫组化、stemloop-RT PCR检测BCRP及miR-302a在乳腺癌组织中的表达;采用荧光素酶报告基因分析法验证miR-302a是否可以靶向抑制BCRP表达;选择乳腺癌耐药细胞MCF-7/MX,通过转染miR-302a mimic增加细胞中miR-302a的表达,采用MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性,流式细胞技术检测细胞内盐酸米托蒽醌的蓄积量,Real time-RT-PCR及Western blot检测BCRP的mRNA与蛋白表达水平。结果 miR-302a与BCRP mRNA 3’UTR区存在结合位点;MCF-7/MX耐药细胞株中miR-302a表达增加后,BCRP蛋白表达水平明显降低(P=0.044);细胞对盐酸米托蒽醌的IC50显著降低(P=0.001),同时,细胞内盐酸米托蒽醌的蓄积量显著增加(P=0.030)。结论 miR-302a通过靶向抑制BCRP蛋白表达增加乳腺癌耐药细胞株MCF-7/MX对盐酸米托蒽醌的敏感性。
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