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肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)是肿瘤微环境重要的组成成分之一,其对肿瘤的发展有很大的调节作用,但具体的调节机制还不是很清楚。有研究表明,Iegumain在肿瘤组织中高表达,并且其表达量与肿瘤的恶性程度呈正相关关系。Legumain是一种天冬酰胺内肽酶,能够在酸性条件下被活化并发挥其酶活性,并对细胞外基质有一定的降解作用,肿瘤微环境中Iegumain是如何影响肿瘤发展的是本课题想要研究的内容。在本课题中,我们构建了Legumain全身性基因敲除小鼠,并构建EO771小鼠乳腺癌肿瘤模型,发现在Legumain敲除鼠中,肿瘤的生长得到明显抑制。进一步研究发现,肿瘤微环境中敲除Legumain不仅抑制了肿瘤的生长,也抑制了肿瘤的凋亡,但是却促进了肿瘤细胞的衰老。于是我们检测了肿瘤组织中Legumain的来源,发现在肿瘤微环境中,Legumain的主要来源是巨噬细胞。于是我们在体外提取了野生型(WT)和Iegumain敲除(KO)小鼠的腹腔来源巨噬细胞,并与EO771小鼠乳腺癌细胞进行共培养,发现与KO小鼠巨噬细胞共培养会诱导肿瘤细胞衰老。为了探究其影响肿瘤细胞衰老的具体机制,我们对共培养后的巨噬细胞进行了RNA-seq测序,筛选发现KO巨噬细胞中与M1巨噬细胞相关的炎性因子IL1-β、iNOS、TF-α、IL-8、IL-6等表达明显高于野生型。有文献报道,一些促炎因子例如IL-1、IL-6和IL-8等能够促进正常细胞的衰老,我们发现KO巨噬细胞能够表达并分泌更多的IL-1β,并且用IL-1β的中和抗体外源性阻断IL-1β能够抑制KO巨噬细胞引起的肿瘤细胞衰老。总之,我们通过以Legumain基因敲除鼠为模型,研究了肿瘤微环境中Iegumain的主要来源,以及巨噬细胞来源Iegumain在肿瘤发展过程中的作用,揭示了Legumain参与肿瘤与肿瘤相关巨噬细胞相互作用的具体机制,为临床靶向治疗肿瘤提供新的治疗策略和理论基础。