论文部分内容阅读
目的:结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,转移是导致结直肠癌患者死亡的主要原因,转移需要新生血管支持,本研究初步探讨EGF重复超级家族成员EGFL6在结直肠癌血管生成及转移中的作用。方法:构建过表达及干扰EGFL6结直肠癌细胞株,收集EGFL6条件培养基并进行Western blot检测,利用鸡胚尿囊膜实验、小管形成实验、内皮细胞迁移实验观察EGFL6对血管形成情况的影响。荧光定量PCR及Western blot检测EGFL6在10对新鲜结直肠癌及癌旁组织中的表达情况。免疫组化检测100例配对结直肠癌组织患者石蜡切片中EGFL6的表达情况。CCK8、Boyden小室侵袭实验、裸鼠皮下瘤及肺定植能力实验观察EGFL6对结直肠癌细胞株体内外生物学行为的影响。结果:荧光定量PCR及Western blot检测结果显示,过表达及干扰EGFL6结直肠癌细胞株构建成功(p<0.001)。Western blot检测结果显示,EGFL6条件培养基制备成功(P<0.05)。鸡胚尿囊膜实验、小管形成实验、内皮细胞迁移实验说明EGFL6能促进体内外血管形成能力(P<0.05)。10例新鲜配对结直肠癌及癌旁组织中,EGFL6在结直肠癌组织中的表达明显高于正常粘膜组织(p<0.05)。100例配对结直肠癌患者石蜡切片中,与正常肠粘膜上皮组织相比,EGFL6在结直肠癌组织表达明显上调(p<0.001)。过表达EGFL6结直肠癌细胞的体外增殖及侵袭能力明显增加(p<0.001);干扰EGFL6结直肠癌细胞的体外增殖及侵袭能力明显降低(p<0.001)。过表达EGFL6裸鼠皮下肿瘤重量明显高于对照组(p<0.01),出现肺脏转移的结节数目明显增多(p<0.05)。结论:EGFL6通过促进结直肠癌血管生成,从而促进结直肠癌细胞增殖、侵袭及转移能力,为临床抗肿瘤转移及药物研制提供新的治疗靶点。