恶性肿瘤是严重危害人类健康的疾病之一,小分子药物在抗肿瘤领域中具有重要的地位。但是,多数小分子抗肿瘤药因为水溶性差、生物利用度低、循环半衰期短、组织分布不合理及不良反应大等特点而发展受限。聚乙二醇(PEG)是优良的水溶性高分子化合物,可由环氧乙烷与水或乙二醇逐步加成聚合得到,通过控制其反应条件,可以得到平均分子质量为几百到几万的高分子聚合化合物[1]。聚乙二醇修饰药物可以明显改善药物分子的水溶性、体内药动学行为,使药物在体内具有靶向性,提高药效,减少其对机体健康组织的损伤[2]。鉴于PEG化药物在体内代谢酶或酸碱的作用下会释放出游离药物,同时监测体内PEG结合型药物、游离型药物、游离PEG的浓度实时变化对于PEG化药物的药效学和毒理学研究有着非常重要的实际意义。传统的PEG化药物分析的方法包括比色法[3]、HPLC法[4]、酶联免疫法[5]和放射标记法[6]不能有效的对PEG化药物、游离药物分子及PEG基团、代谢产物进行区分,不适合复杂生物基质中PEG化药物的分析;液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)为PEG化药物分析提供了可能的解决方案。本研究采用碰撞诱导解离(CID)技术,建立了基于碰撞能量CE的CID In-Quadrupole的LC-Q/Q/TOF串联质谱方法,运用MSAll和SWATH(Sequential Windowed Acquisition of All Theoretical Fragment Ion Mass Spectra)扫描模式,通过监测PEG特异性和药物特异性的碎片离子来完成PEG化药物及游离PEG的分析,该方法重现性好,灵敏度高,高分辨率的碎片离子选择能够有效的消除干扰离子的影响,适合复杂生物基质中PEG及PEG化药物的分析,为PEG化药物的设计及安全性、有效性评价提供了强有力的分析工具。