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目的为了开展包虫病终末宿主主要是家犬的流行病学监测提供更加精确的无创检测手段,以替代槟榔碱导泻和双抗夹心酶联免疫法。从家犬粪便中提取用DNA,用PCR方法检测细粒棘球绦虫。方法 14条家犬解剖后显微镜下鉴定计数小肠内的细粒棘求绦虫。用犬粪采集棒从家犬肛门处收集粪样本约1克,溶解于ASL缓冲液中后用液氮与65度水浴冻溶3次,酚氯仿抽提后将DNA溶解于水中,结合QIAGEN粪便DNA提取和UNIQ-10 DNA纯化商业试剂盒进一步纯化从犬粪中提取DNA,消除或降低其中的抑制因子,用PCR技术通过添加牛血清白蛋白保护PCR反应中的DNA聚合酶,来扩增编码细粒棘球绦虫12s rDNA,检测该靶DNA片段(255bp)。在体外实验中用水泡带绦虫、羊绦虫、多头绦虫的DNA观察所建立PCR方法的特异性。将细粒棘球绦虫虫卵显微镜下计数后,稀释为1000、100、10、1个虫卵,进行灵敏性的检测。将粪便的PCR检测结果与解剖结果进行比较。结果所建立的PCR方法在体外实验中能够检测出1个细粒棘球绦虫虫卵,不能对水泡带绦虫、羊绦虫、多头绦虫的DNA样本扩增。对8例家犬体内成虫数在80条以上者包括2条犬带虫数在10000以上,2条在1000条以上,2条在100条以上,2条在80-100,PCR方法均能够检测出,但对于2例家犬体内成虫数在4和5条的样本,PCR检测结果为阴性,未能检测出。对于4例小肠内包虫阴性,同时存在其它寄生虫(如犬弓首蛔虫、线虫)的家犬样本检测结果均为阴性。结论初步建立了灵敏度、特异度较好的能够现场检测应用的检查家犬粪便中的细粒棘球绦虫的PCR方法 。