【摘 要】
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目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(mesenchymal stem cells conditioned medium,MSCCM)对慢性酒中毒神经细胞的保护作用及相关的分子机制。方法分离、纯化、培养大鼠原代
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目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(mesenchymal stem cells conditioned medium,MSCCM)对慢性酒中毒神经细胞的保护作用及相关的分子机制。方法分离、纯化、培养大鼠原代皮质神经元细胞;在体外分离、培养大鼠骨髓MSCs的基础上,收集MSC-CM。将培养的神经元分为对照组、MSC-CM对照组、慢性酒中毒组、MSC-CM治疗组及LY294002(PI3K通路阻断剂)组。通过流式细胞术检测不同处理细胞的凋亡情况;免疫印迹法检测细胞内信号转导分子p-Akt的表达情况。结果(1)长期酒精暴露的皮质神经元细胞的凋亡率(37.38±2.78%)明显高于对照组(10.18±1.23%)(P<0.01);(2)MSC-CM能够明显减少长期酒精暴露神经元的凋亡率(P<0.01),且与对照组无显著差异(P>0.05);(3)长期酒精暴露可以引起神经元细胞内p-Akt表达明显减少(P<0.01),而MSC-CM能够明显逆转这种现象(P<0.01),还进一步促进了PI3K/Akt通路的激活(P<0.01);(4)LY294002能够部分地阻断MSC-CM引起的细胞凋亡减少(P<0.01)。结论(1)首次证实骨髓间充质干细胞条件培养基能明显缓解慢性酒精暴露引起的神经细胞的凋亡性损伤;(2)其抗凋亡作用的分子机制部分是通过激活PI3K/Akt通路实现的。
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