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紫杉醇(Paclitaxel,PTX)为新型的微管稳定剂,它对转移性卵巢癌、乳腺癌和非小细胞肺癌等癌症具有很好的疗效。但因其水溶性差、生物利用度低极大的限制了其在临床上的应用。临床上常用紫杉醇注射液是泰素(Taxol)是将PTX溶于聚氧乙烯蓖麻油与无水乙醇的混合溶剂中制得的。由于纳米混悬剂(Nanosusp ensi on)可以增大药物的表面积提高难溶性药物的生物利用度及改善难溶性药物的体内分布,已经成为目前解决难溶性药物在临床上应用最有效的途径之一。本实验采用溶剂沉淀结合高压均质的方法制备纳米混悬剂,以提高载药量,增加药物的吸收速度和吸收率,提高生物利用度。本论文的研究内容主要采用溶剂沉淀结合高压均质的方法进行PTX纳米混悬剂的制备以及体内外相关基础研究,主要包括纳米混悬剂稳定剂的合成及PTX纳米混悬剂的制备、表征、体外释放度、细胞毒性实验、采用小动物活体成像技术评价PTX纳米混悬剂在组织中的分布及体内的抑瘤实验等。Chol-PEG1000-FA 稳定剂的合成。Cholesterol-PEG1000-NH2(Ch ol-PEG1000-NH2)中的氨基与叶酸中的γ羧基发生酰胺反应从而实C holesterol-PEG1000-NH2的氨基与叶酸的羧基化学偶联。采用溶剂沉淀结合高压均质方法制备PTX纳米混悬剂,分别以mPEG1000-Chol为稳定剂制成PTX/mPEG1000-Chol纳米混悬剂及mP EG1000-Cho1和Chol-PEG10oo-FA的混合物为稳定剂制成PTX/Chol-PEG1000-FA纳米混悬剂。制成PTX/mPEG100o-Chol纳米混悬剂的载药量为(36.0±1.7)%(w/w),制成的 PTX/Chol-PEG1000-FA 纳米混悬剂载药量(47.9 ±1.2)%(w/w)。然后对所制得的样品进行表征,PTX/mPEG10000-Chol纳米混悬剂粒径为(203.96±2.63)nm,多分散指数(PDI)为 0.188±0.010,P TX/(C1101-PEG1000-FA纳米混悬剂粒径为1 76.80±3.65 nm,PDI为0.118±0.010。透射电镜结果显示PTX/Chol-PEG1000-FA纳米混悬剂及PTX/mPEG1000-Chol纳米混悬剂样品形态呈球形,PTX在PTX/C hol-PEG1000-FA纳米混悬剂中以无定型态存在。PTX/Chol-PEG1000-FA纳米混悬剂体外释放呈现缓释,释放72小时仅仅释放78.3%。在此基础上采用MTT法对PTX/Chol-PEGG1000-FA纳米混悬剂的毒性进行了评价。MTT结果分析显示细胞毒性Taxol>PTX/Chol-P EG100o-FA纳米混悬剂>PTX/mPEG1000-Chol混悬剂,其IC50值分别为 0.7106,1.183 和 5.430 μg/mL。其中 PTX/Chol-PEG1000-FA纳米混悬剂的毒性是PTX/mPEG1000-Chol纳米混悬剂毒性的4.6倍。为了研究PTX/Chol-PEG1000-FA纳米混悬剂在4T1荷瘤鼠体内的组织分布行为和对肿瘤的靶向能力。一个近红外的荧光探针DIR被包封在PTX纳米混悬剂中用于荷瘤鼠的体内成像。成像结果结果显示包裹DIR的PTX/Chol-PEG1000-FA纳米混悬剂在肿瘤中的分布明显高于DIR被包裹在PTX/mPEG1000-Chol纳米混悬剂和DIR溶于Taxol中。对肿瘤部位和肝脏部位的荧光进行荧光光子数定量,并以相对强度大小(肿瘤荧光光子数/肝脏荧光光子数)来评价PTX/Ch ol-PEG1000-FA纳米混悬剂对肿瘤的靶向能力,靶向能力结果为PT X/Chol-PEG1000-FA 纳米混悬剂>PTX/mPEG1000-Chol 纳米混悬剂>F A inhabition>Taxol。荧光素标记的4T1细胞(4T1-luciferase)荷瘤鼠的抗肿瘤药效学,结果表明同为PTX 30mg/kg,小鼠成像结果和肿瘤体积变化图及肿瘤重量图都显示出抗肿瘤效率PTX/Chol-PEG10oo-FA纳米混悬剂>PTX/mPEG1000-Chol纳米混悬剂>Taxol。这些结果都表明PTX/C hol-PEG1000-FA纳米混悬剂将来能够成为主动的靶向制剂。它可以明显提高治疗肿瘤的效率和减少毒副作用。