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分子标记辅助选择是现代分子育种学与传统育种学的结合,借助与目的基因紧密连锁的分子标记,对育种材料从DNA水平上进行选择,从而避免了依赖于表型性状的表现间接推断其基因型,缩短了育种年限,提高了育种效率。一、引物的筛选利用前人研究结果,选取与抗灰斑病基因紧密连锁的SSR引物satt547、satt244、SOYGPATR和satt565,利用我单位抗灰斑病骨干亲本垦丰16及与其有亲缘关系的36份己知抗病性的品种(系),于2009年用幼叶CTAB法提取全DNA,对这4对引物进行了筛选,结果表明:satt244、satt547和SOYGPATR的符合度分别为85%、85%、55%,说明有垦丰16抗灰斑病基因的后代可用这3对引物进行辅助选择。二、引物验证选取以垦丰16为母本配制的4个组合(抗×中抗、抗×感)两种类型)F4代单株,每个组合2153株不等,连同亲本共计161株,对其对灰斑病的抗性进行分子标记选择与田间接种表现进行符合程度验证。1、分子标记选择结果实验于2012年的34月进行。每株取5粒种子,采用SDS法提取混合DNA,用筛选出的3对引物进行SSR标记,与垦丰16带型一样的记为1(R),与感病亲本带型一样的记为2(S),二者都有的记为3(MR)。2、田间接种验证将黑龙江省农科院佳木斯分院提供的灰斑病混合小种,在高粱培养基培养后,于2012年7月18日和24日傍晚人工喷雾接种,8月78日按照病斑型级数法调查各行发病情况,以每株发病最重叶片的病级记载,计算各行病情指数,根据亲本病情指数及各组合平均病情指数,划定各级别病情指数指标,将各行抗病程度分为抗、中抗、感病3个级别,分别对应SSR标记读带的1、3、2,统计符合程度。结果表明:抗×中抗组合3对引物的符合度均不高。抗×感3个组合符合度较高,satt244为90.6%、91.7%和90.5%;satt547为73.6%、61.1%和95.2%;SOYGPATR为77.4%、61.1%和76.2%。三、结论与讨论引物satt244、satt547和SOYGPATR可以用在以垦丰16为抗原的抗×感组合后代抗灰斑病辅助选择育种。