【摘 要】
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研究目的:作者:刘鹏,张善勇明确正常软骨细胞内的蛋白质组在白介素-1β刺激后的蛋白的表达差异。为颞下颌关节软骨炎症的诊断治疗提供新的思路。研究方法:我们用ADTC-5细胞分
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科;
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研究目的:作者:刘鹏,张善勇明确正常软骨细胞内的蛋白质组在白介素-1β刺激后的蛋白的表达差异。为颞下颌关节软骨炎症的诊断治疗提供新的思路。研究方法:我们用ADTC-5细胞分为两组体外培养96h,一组不做任何处理,一组使用白介素(100ng/ml)刺激。对于每种培养条件下,蛋白质提取于4组重复的组后用相对和绝对定量(iTRAQ)标记和LC-MS/MS分析来识别表达不同的蛋白质。通过生物信息学分析筛选出对应的蛋白及基因,RT-q PCR检测细胞中蛋白对应基因的表达差异,Western蛋白印记检测细胞中的表达特异性蛋白所对应的基因表达差别,采用免疫组化来观察分析细胞中蛋白在有无白介素-1β刺激软骨组织中的差别。研究结果:我们发现了32种蛋白在白介素-1β刺激后明显特异性表达和正常的ADTC-5所比较。24在骨关节炎中起到用一定作用,13个是分泌蛋白,经过生物信息学分析后Vps35,RPL4,Hnrnpa2b1,Pgk1表达差异最为明显,经过Wesrtern蛋白印记检测和RT-q PCR检测进一步确定,以及免疫组化实验在组织中检测。研究结论:白介素-1β刺激软骨细胞导致软骨细胞中蛋白质表达异常,这些数据提供了颞下颌关节软骨炎症的潜在诊断标志物,为颞下颌关节软骨炎症的发病机制提供了新的思路,Vps35能做为颞下颌关节软骨炎症的很有前景诊断标志物,尽管需要大规模的研究,也为发现软骨炎症新的治疗方案铺平了道路。
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