目的:肺炎支原体是引起儿童社区获得性肺炎的主要病原体之一,严重威胁着儿童的健康。传统的肺炎支原体检测方法包括培养、血清学抗体测定、real-time PCR,但上述检测方法均费时且操作复杂。本研究利用免疫层析法直接检测肺炎支原体抗原,用于鉴定儿童肺炎支原体感染。方法:设计并制备特异靶向肺炎支原体P1抗原的抗体,制作免疫层析胶体金板条(杭州创新生物检控有限公司)。收集302例疑似肺炎支原体感染患儿的咽拭子或痰液标本,进行免疫层析鉴定和real-time PCR(肺炎支原体荧光定量PCR试剂盒,广州达安公司)鉴定。结果:Real-time PCR检测出78例肺炎支原体阳性标本,阳性率为25.83%。胶体金免疫层析法检测出76例阳性标本,阳性率为25.17%,且均为real-time PCR阳性标本。Kappa检验结果表明两种方法一致性具有显著统计学意义((kappa值=0.983,p=0.000)。以Real-time PCR为金标准,胶体金免疫层析法特异性和灵敏性分别为97.44%和100%。结论:本免疫层析胶体金板可以快速简便鉴定儿童肺炎支原体感染,且具有较高的特异性和灵敏性。本方法可用于临床儿童肺炎支原体感染的筛查和床边快速鉴定。