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鸡球虫病是一种肠道寄生虫病,对全球家禽业造成巨大的经济损失。目前,主要的控制策略是在饲料中施用抗球虫药,如磺胺氯吡嗪钠(SC)、地克珠利等。然而,过度使用抗球虫药导致耐药性增加。为了获得田间分离株中球虫病的流行和磺胺氯吡嗪钠耐药性的信息,从而为中部地区使用抗球虫药提供合理的指导,我们从河南省和湖北省137个养鸡场中收集了318份新鲜粪便样本。利用核糖体DNA的内部转录间隔区1 (ITS1)序列来鉴定球虫分离虫株种类。然后从不同的鸡场中随机选择了102个样本,通过鸡体笼养试验来评估耐药性,并且筛选到含有柔嫩艾美尔球虫的抗药虫株,进行DHPS抗药基因的扩增及测序分析,建立了磺胺耐药柔嫩艾美尔球虫ARMS-PCR和LAMP检测方法,对含有柔嫩艾美尔球虫的临床样品进行了检测。特异性PCR结果所示,鸡艾美球虫的阳性率为97.25%(309/318),最常见的物种为和缓艾美球虫(66.67%),柔嫩艾美球虫(46.86%)和毒害艾美球虫(41.51%)。鸡体笼养试验表明,有25株对磺胺氯吡嗪钠完全耐药(24.51%),其中河南有16株,湖北有9株;24株有部分抗性(23.53%),河南有16株,湖北有8株。而且本研究所建立的ARMS-PCR和LAMP的方法特异性敏感性良好,能成功运用于临床样品的检测,总体而言,这些数据表明鸡球虫病在河南省湖北省无处不在,磺胺氯吡嗪钠的耐药性也很普遍,快速检测磺胺耐药柔嫩艾美尔球虫的分子方法大大提高了球虫抗药性检测的效率。