PK/PD参数预测左氧氟沙星抑制金黄色葡萄球菌耐药突变的研究

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目的通过体外药效学模型探讨预测抑制细菌耐药突变的PK/PD参数折点。方法建立体外药效学模型,受试菌S.aureusRN450,RN450-A1和临床分离菌99对左氧沙星的MPC/MIC不同(分别为32,64和8),模拟左氧沙星每日一次给药连续给药3日。对每一种受试菌,模拟三个不同的AUC24/MIC,使左氧沙星的药物浓度在大部分给药时间落在MSW中,在大部分给药间隔在MSW上。对体外药效学模型中筛选出对左氧沙星耐药的细菌测定MIC观察耐药变迁,通过PCR扩增耐药靶位基因gyrA和grlA,检测其耐药突变位点,比较不同PK/PD参数与细菌耐药突变发生的相关性。结果体外药效学模型中三株受试菌RN450,RN450-A1和99的MPC/MIC分别为24、64、8。对RN450,AUC为23、43时体外药效学体系中总细菌的数量先在给药后降低后又恢复生长,而其中耐药菌的数量逐渐增加,在72h后体系中的敏感细菌被清除,细菌已经基本为耐药菌,72h体系中的细菌的MIC(MICf)较初始MIC增加(MICi),MICf/MICi为4~8;当AUC分别为76时,体外药效学体系中敏感菌和耐药菌数量均降低,72h时已观察不到耐药菌的生长,72h体系中的细菌的MIC与初始MIC没有变化。RN450-A1和99不同AUC时可以得出类似的结论,RN450-A1的MICf/MICi为32,SA99的MICf/MICi为4。体外药效学体系中筛选出耐药突变菌的靶位变异位点为grlA基因的Glu84→Lys或Ser80→Phe位点突变。Cmax/MIC和AUC/MIC与细菌耐药突变没有相关性,Cmax/MPC和AUC/MPC能准确的细菌耐药。结论以MPC为基础的PK/PD参数(Cmax/MPC和AUC/MPC)相比以MIC为基础的PK/PD参数(Cmax/MIC和AUC/MIC)更适于预测抗菌药物抑制细菌耐药突变的折点。
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