目的采用组织块细胞培养法进行膝骨性关节炎患者退变软骨组织的细胞培养、传代及形态特征观察。方法 6例患者标本均来源于云南中医学院第一附属医院骨科确诊为膝骨性关节炎的住院患者,行人工膝关节置换手术切出的新鲜退变软骨组织,采用组织块培养法培养原代细胞,待原代细胞长满皿底,用2.5g/L的胰蛋白酶溶液进行消化,传代细胞爬片增殖1周,用4%的多聚甲醛固定15min,进行甲苯胺蓝、阿力新蓝染色及Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、X型胶原、BFGF、MMP13免疫荧光观察。结果原代培养第7～9天可见少量细胞散在分布于组织块周围,3周出现细胞自融,4周基本长满皿底。细胞多呈梭形或多角形,细胞核偏于细胞的一侧而贴近细胞膜。Ⅱ型胶原和Ⅰ型胶原免疫荧光均有一定的表达,BFGF、MMP13、X型胶原免疫荧光表达均较高。结论通过组织块细胞培养法能获得一定数量的退变软骨细胞,可成功地进行传代及形态特征观察;同时提示膝骨性关节炎患者退变软骨细胞主要为成纤维样软骨细胞和肥大软骨样细胞,并伴有大量降解酶的释放。