【摘 要】
：
目的克隆得到金黄色葡萄球菌的新型肠毒素K(sek)基因,构建其原核表达载体,进行原核体外表达与纯化。方法采用PCR技术从金黄色葡萄球菌ATCC6538染色体DNA中扩增得到新型肠毒素
论文部分内容阅读
目的克隆得到金黄色葡萄球菌的新型肠毒素K(sek)基因,构建其原核表达载体,进行原核体外表达与纯化。方法采用PCR技术从金黄色葡萄球菌ATCC6538染色体DNA中扩增得到新型肠毒素SEK的ORF全长序列,TA克隆到载体(pMD19-T)中,挑选正确的转化子后进行序列的测定。将克隆得到的sek基因片段与pET28a原核表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,在不同时间不同诱导温度进行IPTG诱导表达条件优化,SDS-PAGE电泳分析,western杂交验证,Ni-NTA进行纯化。结果克隆得到该菌株的sek基因全长,核苷酸序列提交到NCBI数据库,基因登录号为GQ358928。表达的SEK在SDS-PAGE图谱的位置与预期相符,Western实验结果表明,组氨酸标签直接标记了该表达序列,读码框正确翻译。通过Ni-NTA纯化得到了基因重组的SEK。结论在大肠杆菌中成功的克隆并表达了金黄色葡萄球菌的新型肠毒素K,为进一步分析新型肠毒素的相关活性位点和研究其毒性作用打下了基础。
其他文献
以STM32单片机为智能语音提示坐垫的控制核心,设计了一款由坐垫、各种传感器及附属装置等组成的智能坐垫系统。系统能够对用户人体压力、久坐时长进行监测,并通过数据采集、
在模具制造过程中,高速铣削技术得到广泛应用,但传统铣削方法模具表面质量难以保证,为此就如何控制铣削加工中模具表面质量进行了分析。针对采用压缩指令避免磨纹、振动纹等铣削缺陷的方法,指出了提高模具表面质量及提高加工效率的具体措施。
目的探讨一次性输液针头代替导尿管在女性膀胱灌注中的应用。方法选取2015年6月~2017年6月在我科行膀胱灌注的60例膀胱肿瘤术后女性患者作为研究对象,随机分为2组,对照组30例
1问题的提出数学教师的教学信念是指教师在教学过程中，对数学学科本质的认识、教师如何教学、学生如何学习、如何评价教学成果等方面所持有且信以为真的心理倾向．
解热镇痛药是一类具解热、镇痛作用，大多数还有显著抗炎、抗风湿作用的药物，多为有机酸类化合物，有相似的药理作用、作用机制和不良反应。 临床应用 水杨酸类——阿司匹林是临床使用最为广泛和持久的解热镇痛药物。①有显著的解热镇痛作用，能使发热者的体温降低到正常，而对体温正常者一般无影响。其镇痛作用对轻、中度体表疼痛，尤其是炎症性疼痛有明显疗效。临床常用于感冒发热头痛、偏头痛、牙痛、神经痛、
目的探讨针刺配合中药治疗过敏性鼻炎的临床效果。方法选取2016年2月—2017年10月长春中医药大学附属医院收治的85例过敏性鼻炎患者作为研究对象，将其按照随机综合序贯法分为2
介绍了土传病害危害程度及生防细菌的种类、作用机制、防治土传病害的研究概况,提出了目前利用生防细菌防治土传病害存在的问题及应用前景。
Introduced the harm degree of
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
高职院校教师科研水平的高低与能力的大小,反映了高职院校在人才培养、社会服务与科学研究方面的水平与潜力。文章以雅安职业技术学院在校教师为调研对象,通过问卷调查获得数