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目的借助肾小球足细胞,观察AngⅡ及小分子干扰RNA(siRNA)沉默TRPC6后对足细胞凋亡率和自噬的影响,以探讨其分子机制。方法设计、合成实验组和对照组小分子干扰RNA(siRNA),转染足细胞,使TRPC6基因沉默,采用流式细胞术及Western Blot技术检测不同浓度siRNA转染后TRPC6基因表达,优化获得TRPC6基因沉默最佳效果的条件。培养小鼠肾小球足细胞,设立对照组,TRPC6基因沉默组,AngⅡ组和3-MA组。采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率,Western blot检测自噬相关蛋白的表达,激光共聚焦观察自噬相关蛋白的分布。结果 (1)正常足细胞呈星形,胞体大并伸出树枝样突起,相邻细胞间形成相互连接。ANGⅡ刺激后足细胞胞体明显缩小(p<0.05),出现足突回缩,失去细胞间连接;足细胞凋亡率24h和48h均较对照组明显升高(p<0.05);TRPC6及LC3-2的表达量各时间点均较对照组明显升高(p<0.05);TRPC6及LC3-2的分布与对照组相比明显异常(p<0.05)。(2)沉默TRPC6后,足细胞凋亡率较正常组未见明显升高,差异无统计学意义(p>0.05),LC3-2的表达量各时间点未见明显升高(p>0.05)。(3)AngⅡ刺激足细胞后运用基因沉默技术沉默TRPC6后,足细胞自噬水平以及凋亡率明显下降,与对照组比较具有统计学意义(p<0.05).结论 AngⅡ对足细胞结构具有损伤作用,使足细胞凋亡率增加,促进足细胞自噬活性增加,而沉默TRPC6后,可以稳定足细胞自噬水平,从而维持裂孔隔膜(SD)结构和功能的完整性,发挥保护足细胞和抗蛋白尿的作用。