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目的 SRF(血清反应因子)是一种高度保守的转录因子,控制上百个基因表达,在多种肿瘤间质组织中高表达。我们前期发现存在SRF甲基化失活的胃癌不易转移,本研究进一步探索SRF促进胃癌转移的细胞通路及作用机制。方法免疫组化及激光共聚焦分析SRF及α-SMA细胞定位。构建人和小鼠SRF全长表达载体以及SRF的shRNA质粒,上调或下调人和小鼠成纤维细胞SRF的表达,收集其无血清条件培养基上清,通过Transwell与肿瘤细胞共培养,观察细胞运动情况,活细胞动态检测系统观察细胞增殖和运动变化。裸鼠成瘤及尾静脉注射实验观察肿瘤生长及肺转移情况。定量RT-PCR及ELISA检测SRF上调或下调引起的基因表达变化。SDF1(间质细胞趋化因子1)抗体和SDF1受体CXCR4抑制剂干扰SRF促肿瘤转移的作用。结果 1.SRF在有转移的胃癌组织中表达升高,免疫组化显示主要表达在胃癌间质细胞中;激光共聚焦分析结果显示SRF表达的细胞α-SMA表达阳性。提示SRF可能通过间质肌成纤维细胞发挥促肿瘤转移的作用;2.上调人成纤维细胞CCD-18Co SRF表达后,其无血清条件培养基能够促进胃癌细胞MKN45的迁移,但是对其增殖无明显影响。相反,用shRNA敲减CCD-18Co细胞SRF表达后,其无血清条件培养基抑制MKN45细胞的迁移,对其增长亦无明显影响。同样地,上调小鼠NIH-3 T3细胞SRF表达后,其条件培养基也能够明显的促进BGC823细胞的迁移及侵袭,对其增殖亦无明显影响;3.上调或敲减CCD-18Co细胞SRF表达后,通过尾静脉与MKN45细胞混合后共注射入小鼠体内,SRF表达上调的CCD-18Co细胞明显促进肿瘤细胞肺转移,而敲减CCD-18Co细胞SRF表达则抑制肿瘤细胞肺转移;4.在SRF上调的CCD-18Co及NIH-3T3细胞中,α-SMA、SDF1等基因明显上调;相反,在敲减SRF或用SRF阻断剂处理的这些成纤维细胞中,这些基因表达降低。在无血清的条件培养基中,SDF1的蛋白含量也随着这些成纤维细胞SRF表达量的上调而增加,随着SRF敲减而降低。使用SDF1抗体或其受体CXCR4特异性抑制剂可阻断高表达SRF成纤维细胞诱导胃癌细胞运动侵袭作用;5.在人胃癌组织样品中,SRF的表达与SDF1有明显的正相关(n=92,r=0.6314,p<0.0001)。结论 SRF能够上调成纤维细胞分泌SDF1,后者再作用于胃癌细胞膜上的受体CXCR4,从而促进胃癌细胞转移。