葡萄糖酸锌碳点对小鼠前成骨细胞促成骨作用的体外研究

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目的:研究葡萄糖酸锌碳点(zinc gluconate carbon dots,Zn-CDs)对小鼠前成骨细胞成骨向分化的影响。方法:通过一步水热法合成葡萄糖酸锌碳点,并对其进行TEM、FT-IR、荧光光谱表征。体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1,使用MTT法评价碳点的细胞毒性,筛选适宜浓度。将细胞与碳点共培养后在激光共聚焦显微镜下观察细胞的成像特点。然后与不同浓度碳点(0、0.01、0.1、1、10、100μg. ml-1)浸提液共培养3,7和14天,qRT-PCR检测成骨相关基因mRNA表达。并培养21天通过茜素红染色检测矿化程度。结果:TEM结果表明Zn-CDs为球形颗粒,分散性好且粒径约为5.25nm,FT-IR结果表明碳点的表面主要由羧基和羟基基团构成,荧光光谱表明碳点具有360nm紫外光激发,450nm蓝光发射的荧光性质,并表现激发波长依赖特性。MTT结果显示碳点浓度在100μg. ml-1以下,没有明显细胞毒性。荧光成像结果显示,MC3T3-E1细胞可以呈现蓝色、绿色和红色的荧光图像。qRT-PCR结果显示Runt相关转录因子2基因(Runx2)、碱性磷酸酶基因(ALP)、骨钙素(OC)和I型胶原蛋白(Col1)基因表达随碳点剂量的增加而增加。茜素红染色结果显示各浓度碳点钙结节量均比对照组多。结论:葡萄糖酸锌碳点具有促进小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1向成骨方向分化的作用。
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