研究目的:探索并建立一套新的唾液采集和检测方法体系,在这个基础上利用多个时间点采集的唾液指标来评价超低温冷疗后的具体恢复效果。研究方法:1)唾液样本收集和处理方法:唾液采集方法选用棉柱咀嚼法,该方法选用采集装置是一种专业唾液采集管,受试者会通过咀嚼采集管中的棉柱来收集唾液样本,具体通过离心、冷冻等步骤将收集好的唾液样本进行离心（2000r/min,10min）,离心的唾液分装冷冻保存并待测;2)唾液、血液样本检测方法:唾液皮质醇、睾酮检测采用德国生产的Roche电化学发光分析仪,试剂盒选用Roche配套测定血清游离皮质醇、睾酮的专用试剂盒;血清睾酮、皮质醇检测采用美国BeckmancoulterACCESS及配套试剂盒;3)唾液、血液指标相关性研究具体操作步骤:收集北京市200个专业运动员的血液和唾液样本,检测血清和唾液皮质醇、睾酮的具体数值,探究其相关性;4)唾液睾酮、皮质醇在超低温冷疗效果评价中的研究中的应用:选取北京市专业手球运动员18人（男性）,随机分为实验组和对照组,在两组运动员同时进行冬季高强度训练时开展相关实验。训练内容包括负重弓箭步、负重深蹲、负重硬拉和负重推车四个动作。负重弓箭步负重统一采用30kg,深蹲、硬拉采个体的70-80%1RM,不同动作的练习组数为4组,组间间歇1-2分钟,每组完成10-12次。负重推车（负重40kg）练习形式为全力推车前行20米,快速返回起点,组间歇1.5分钟,一共四次。整堂训练课完成时间大约为两个半小时之内。两组运动员的训练方案保持一致,训练课之外的技战术训练保持一致,作息时间、饮食习惯一致。实验组在训练课结束后进行超低温全身冷冻治疗（130℃,150s）,对照组不进行冷疗。在实验日的当天晨起7:00、训练前（下午3:00）、训练后即刻（下午5:30）、冷疗后即刻（下午6:00）、冷疗后30min（下午6:30）、冷疗后2h（晚上8:00）、次日晨起7:00收集唾液样本,同时于当日和次日晨7:00采集血液样本。研究结果:1)唾液皮质醇和睾酮测试的重复性检验:唾液睾酮、皮质醇的CV值均<10%;2)唾液皮质醇和睾酮测试的线性范围:唾液皮质醇[2.0-18]nmol/L范围内R2>0.99,睾酮在[0.1-0.4]ng/L范围内R2>0.99,两者线性偏差均<±10%,线性偏差<±3%;3)唾液皮质醇、睾酮与血清皮质醇、睾酮之间的相关性:唾液皮质醇和血清皮质醇的相关系数r=0.806,两者之间的相关性较高,而唾液睾酮和血清睾酮之间的相关系数r=0.343,两者相关性较差;4)超低温冷疗前后不同时间点唾液睾酮和皮质醇指标的变化:实验组和对照组的皮质醇指标在前三个时间点无明显差异,在冷疗后即刻（pm6:00）实验组明显下降26.70%,对照组明显上升36.95%,组间比较P<0.05,冷疗2小时后、两次晨起,实验组和对照组变化没有显著性差异;实验组和对照组的睾酮在前三个时间点也无显著性变化,冷疗后即刻（pm6:00）实验组先缓升0.93%后缓降0.04%,对照组逐渐下降9.31%和7.09%,冷疗后半小时和两小时两点实验组睾酮浓度明显高于对照组（P<0.05）,次日晨起实验组升高趋势高于对照组（P<0.05）。研究结论:（1）唾液皮质醇和睾酮检测方法的重复性和准确性较高。（2）唾液皮质醇和血清皮质醇之间存在较好的相关关系,唾液皮质醇可以比较准确反映血清中的皮质醇,可以用唾液皮质醇来替代血清皮质醇的测试。（3）唾液睾酮与血清睾酮之间的相关关系较差,可能与血清中测试的是总睾酮,而唾液由于是超滤液,测试的主要是游离睾酮,由于游离睾酮具有生物活性,更能反映运动员的状态,建议可以用唾液睾酮来评价运动员体内合成代谢的状况。（4）超低温冷疗后就可以迅速抑制高强度训练引起的皮质醇升高,降低应激反应,冷疗2小时后,这种降低皮质醇的效应就会消失。冷疗后即刻到冷疗后2小时内,唾液睾酮能维持在一个较高的水平,且这种效应能维持到次日晨起。表明超低温刺激能降低高强度训练后的应激反应,促进肌肉组织合成代谢,加速机体疲劳的恢复,利用唾液皮质醇和唾液睾酮指标能较好地反映超低温冷疗恢复的具体效果,且唾液指标无创,具有较好的实践意义,也值得在其他相关研究和应用中进行推广。