根据马铃薯上的3种病原菌,即致病疫霉(Phytophthora infestans)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)AG3融合群和茄链格孢菌(Alternaria solani)的核苷酸保守序列,分别设计3对特异引物,从影响多重PCR扩增的因素,如退火温度和引物比例,对反应体系进行了优化,建立了一种能够同时检测致病疫霉、立枯丝核菌和茄链格孢菌的多重PCR检测体系。结果表明,该检测体系具有较高的灵敏度和良好的特异性。致病疫霉、立枯丝核菌和茄链格孢菌基因组DNA的检测限依次为:10pg/μL、1pg/μL和1pg/μL。该检测方法实现了对马铃薯上的3种病原菌的高效、快速的同时检测,提高了检测效率,降低了检测成本,具有较高的应用价值,可应用于这3种病害的早期诊断和病原菌的监测、鉴定,为防治病害提供可靠的技术和理论支持。