在酪氨酸激酶和磷酸酶作用下的酪氨酸可逆磷酸化在一系列信号转导通路中发挥着重要的作用。当前酪氨酸磷酸化蛋白质组学研究的覆盖度和灵敏度不足,制约其下游的生物学研究的开展,亟需开发相关新技术、新方法。此前,酪氨酸磷酸化抗体是唯一有效的磷酸化酪氨酸蛋白质富集手段。但抗体价格昂贵,不利于在实验室中大量使用。最近我们发现突变SH2模体-即SH2超亲体可以应用于酪氨酸磷酸化蛋白质或肽段的富集,其富集能力达到或优于常规商品化抗体。最近我们发展了基于SH2超亲体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法研究。通过将SH2超亲体进行活性共价固载,克服实验流程繁琐,与质谱兼容性不佳的缺点。这种方法与原方法相比,可以多鉴定41%的酪氨酸磷酸肽。该方法被应用于分析不同的样品,都取得了很好的效果。对于高度酪氨酸磷酸化的样品,如矾酸钠处理的Jurkat T细胞,可以从2毫克的样品中鉴定多达1800个高可信的酪氨酸磷酸化位点;对于没有刺激的Jurkat T,也可以从5毫克样品中鉴定343个酪氨酸磷酸化位点;对于组织样品,可以从5毫克鼠骨骼肌蛋白质中鉴定197个酪氨酸磷酸化位点。该方法结合稳定同位素二甲基标记,用于定量分析HeLa细胞在EGF刺激前后酪氨酸的动态变化,实现了了262个酪氨酸磷酸化位点的定量。总之,该方法具有高灵敏、超便宜、高稳健的特点,在酪氨酸磷酸化的研究方面将能获得广泛应用。