目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤 U-20S 细胞的诱导凋亡作用。方法:(1)培养人骨肉瘤 U2-OS 细胞。(2) 筛选对骨肉瘤 U2-OS 细胞作用最佳的片仔癀含药血清。(3)在倒置相差显微镜和光镜下观察骨肉瘤 U2-OS 细胞形态,用 MTT 法测细胞活力。(4)原位末端标记:骨肉瘤细胞胰酶消化置于左旋多聚赖氨酸铺片上至细胞贴壁;在超净台内风干,室温固定25min。PBS 通透液促渗5min,滴加 Equilibration Buffer 100μl覆盖细胞。含 rTdT 酶的 TUNEL 反应液37℃,湿润避光反应60分钟。新鲜配制 DAB 工作液显色反应,光镜观察。(5)提取基因 DNA,将10μlDNA 样品加入2μl的10×Loading Buffer,混匀,立即加到含有0.4μg/ml 溴化乙啶的1%琼脂糖凝胶电泳,室温,1小时。紫外线灯下观察,凝胶成像系统扫描存盘。以 DNA 琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。结果:实验组 TUNEL 检测阳性,琼脂糖凝胶电泳出现 DNA 的片段化,随着作用时间延长和浓度增加,凋亡率增高;电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论: 中药片仔癀胶囊对骨肉瘤 U-20S 细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用。