论文部分内容阅读
目的:建立Hras12V癌基因诱导的小鼠肝肿瘤细胞系,为携带Ras癌基因肝肿瘤细胞的生物学特性及治疗研究提供生物学材料.
方法:选取9月龄Hras12V转基因雄鼠一只,采取肝肿瘤组织,通过组织培养的方法获取肝肿瘤细胞系.并通过PCR、Cell cycle以及Western Blot等一系列实验鉴定该转基因小鼠肝癌细胞系的基因型和细胞生物特性.
结果:通过肝肿瘤组织原代培养的方法获取原代肝肿瘤细胞后,经反复传代最终获得了来自Hras12V转基因雄鼠的稳定肝肿瘤细胞系MMHRL3.该细胞系的细胞形态较为一致,增殖状态良好.分子生物学检测结果表明,该细胞系携带Hras12V转基因,具有肿瘤细胞特性.而且MMHRL3细胞中MEK/ERK和AKT/mTOR信号通路激活.这些生物学特性与Hras12V转基因小鼠的肝肿瘤特性相同.
结论:本实验室成功建立了Hras12V转基因肝癌雄鼠的肝肿瘤细胞系.MMHRL3细胞系为肝肿瘤发生发展的机制研究及靶向MEK/ERK和AKT/mTOR信号通路的分子药物的开发提供了良好的研究对象.