研究背景:人γδT细胞是一群存在于外周血、同时具备天然免疫和适应性免疫双重功能、可应用于肿瘤免疫细胞治疗的T细胞。γδT细胞可广谱但选择性的识别、杀伤功能异常或被感染的细胞,其识别和杀伤涉及靶细胞表面的MICA/B、磷酸抗原等正常细胞不表达或低表达的分子,而且该过程不涉及MHC分子的限制性,使其具有很高的临床应用前景。在人体中,γδT细胞只占外周血CD3~+T细胞的10%以下。如何大量扩增并获得高细胞活性的γδT细胞是制约其临床应用的难题。研究目的 :探究γδT细胞的体外扩增条件,以提高其存活及对肿瘤细胞的杀伤能力。并在临床上首次证明同种异体γδT细胞治疗的安全性和有效性。实验方法 :抽取健康志愿者外周血100ml,分离PBMCs,通过加入唑来膦酸,IL-2和其他细胞因子和营养成分在体外大量扩增γδT细胞。经质检后,回输给患者。患者每2周进行一次细胞回输,每次约1×10~8个细胞,连续回输三天,共计3～4×10~8个细胞。回输后不同时间点对病人肿瘤大小及转移情况进行追踪观察,并对病人免疫功能进行评估。实验结果 :研究结果表明,我们新的培养技术能提高γδT细胞的增殖能力,能在体外特异性大量扩增高纯度的γδT细胞,并且可显著提高发挥抗肿瘤活性的效应型γδT细胞比例;不仅对血液瘤有效,对实体瘤也有效。此外,我们通过人源化小鼠的肺癌模型验证了同种异体γδT细胞回输的安全性和有效性。并且在国际上首次临床证明了同种异体γδT细胞用于恶性肿瘤治疗的安全性和有效性。目前,临床上已对136例晩期肿瘤患者进行了超过500次的γδT细胞回输治疗。截止目前为止,所有患者未出现高烧、细胞因子风暴等临床副作用。经过5次以上回输的患者病情得到缓解,免疫功能得到改善。结论 :经过我们改良的γδT细胞抗肿瘤能力加强,并在国际上首次证明同种异体间γδT细回输具有一定的安全性和有效性。