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[目的]小鼠淋巴瘤细胞胸腺激酶(TK)位点基因突变试验(MLA)是一种具有高敏感性的体外哺乳动物细胞遗传毒性评价试验方法。本试验通过研究柚皮素对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因是否具有致突变作用,旨在为柚皮素的安全应用提供依据。[方法]小鼠淋巴瘤细胞L5178Y经自发突变清除后,依据细胞抑制试验结果,将柚皮素给药组浓度分别设置为32μg/mL、80μg/mL、200μg/mL和500μg/mL(药物接触4h),同时设溶媒对照组(DMSO)和阳性对照组,在非代谢活化条件下,阳性对照为4-硝基喹啉(4NQ),代谢活化条件下,阳性对照为苯并芘(BP)。细胞进行表达培养,并计算总悬浮增长率(SG),2d表达培养结束后,将细胞进行梯度稀释并铺平板。11d后进行平板接种效率(PE)和突变频率(MF)的测定。[结果]2d培养后非活化溶媒对照组SG为24.1,活化溶媒对照组SG为19.5,均在标准8～32之间,说明细胞生长状态良好。11d培养后通过计数平板中每孔的大小克隆数计算PE与MF。小鼠淋巴瘤试验阴性对照组成立的条件为PE在65%～120%之间,MF在(50～170)×10～(-6)之间,本试验非活化溶媒对照组细胞PE为95%,MF为73.4×10～(-6),活化溶媒对照组PE为101%,MF为125.1×10～(-6),均符合试验成立条件;阳性对照组应满足突变率绝对增加,比自发背景突变率增加至少300×10～(-6),本试验非活化阳性对照组细胞MF为618.3×10～(-6),活化阳性对照组MF为665.3×10～(-6),均符合试验成立条件。柚皮素给药组终浓度为32μg/mL、80μg/mL、200μg/mL和500μg/mL时的MF,在非活化条件下分别为94.1×10～(-6)、104.2×10～(-6)、85.6×10～(-6)和125.3×10～(-6)。在活化条件下分别为182.1×10～(-6)、158.1×10～(-6)、185.0×10～(-6)和164.2×10～(-6),各浓度组的突变率无浓度依赖性增加或可重复性的增加。[结论]柚皮素小鼠淋巴瘤试验结果为阴性,说明柚皮素对小鼠淋巴瘤细胞没有遗传毒性。通过小鼠淋巴瘤试验可以评价其他现代中药是否具有致突变作用,可以为现代中药的安全应用提供更多依据。