产蛋鸡原代肝细胞氧化应激模型的建立

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本试验旨在研究不同浓度过氧化氢(H2O2)对产蛋鸡肝细胞氧化应激状态的影响,以建立产蛋鸡肝细胞氧化应激模型。采用原位二步灌流法分离产蛋鸡肝细胞,按H2O2处理浓度(0mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、4mmol/L和8mmol/L)分为6组,用不同浓度H2O2干预肝细胞2h,分别测定肝细胞存活率(MTT法)、细胞内丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)含量或活性。结果表明:随H2O2浓度升高,肝细胞存活率极显著降低(P<0.01),4mmol/L的H2O2处理肝细胞2h后,细胞存活率为对照组的58.28%,当H2O2浓度达到8mmol/L时,细胞明显大量脱落凋亡,造成不可逆损伤;随H2O2浓度增加,细胞内ROS和MDA含量较对照组极显著增加(P<0.01),抗氧化酶SOD和GST活性升高(P<0.05),4mmol/L的H2O2处理肝细胞显著升高细胞内ROS和MDA含量。结果提示,H2O2引起肝细胞氧化应激损伤呈剂量依赖性,4mmol/L H2O2处理肝细胞2h,能使产蛋鸡肝细胞产生适度的氧化应激,可作为产蛋鸡肝细胞的氧化应激模型。
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