质谱技术在川乌质量控制及活性评价研究中的应用

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利用质谱及其新技术为分析手段,进行川乌化学及生物指纹图谱等质量控制新方法以及抗炎活性和体外代谢分析方法的研究。采用UPLC-MSn技术,结合化学计量学的相似度分析、系统聚类分析和主成分分析方法,用于制川乌指纹图谱的建立及评价。建立了一种同时定量川乌中六种乌头类生物碱的二维UPLC-UV-MS定量方法,扩大了分析样品的浓度范围。采用实时直接分析质谱技术对制川乌快速质量控制的方法进行了研究。证明实时直接分析质谱指纹图谱结合化学计量学方法能够对川乌的质量进行快速的鉴别。同时建立了DART MS技术在川乌饮片中的原位鉴别方法。此外还建立了乌头类双酯型生物碱肠内菌生物转化样品的实时直接分析质谱检测方法。利用离心超滤质谱技术从川乌总生物碱提取物中筛选并鉴定出了9种与重要载体蛋白-人血清白蛋白存在相互作用的乌头类生物碱。建立了川乌的人血清白蛋白配体指纹图谱。利用离心超滤质谱法筛选与抗炎靶点—环氧化酶-2(COX-2)存在相互作用的生物碱成分,从而找出川乌中具有潜在抗炎作用的乌头类生物碱。同时分别建立了与生川乌和制川乌的生物活性-抗炎活性相关的生物指纹图谱,实现了从常规指纹图谱向生物活性指纹图谱的转变。采用前列腺素E2衍生化分析的方法,对川乌中六种主要的乌头类生物碱的COX-2的抑制活性进行了考察。结果表明,单酯型生物碱中抑制活性比较高的是苯甲酰次乌头原碱;双酯型生物碱中,抑制活性比较高的是次乌头碱。并证明此方法可以用于生物样品的分析。
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