电刺激对软骨细胞增殖及细胞内Ca2+浓度的影响

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zgxkz
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目的寻求促进体外培养的软骨细胞增殖的适宜电刺激参数,探讨软骨细胞增殖与细胞内Ca2+浓度之间的关系。方法使用3-5日龄家兔肋骨软骨细胞(Pri Cells),经过2次传代培养,将细胞按照4×104/孔的密度接种于6孔培养板内,次日利用函数信号发生器刺激细胞。采用占空比20%的方波波形,频率1 Hz,按照电压大小将细胞分为5组:电压1 V组、2V组、3 V组、5 V组和0 V组(无刺激组)。各组细胞每日刺激20 min,连续刺激3 d。CCK-8法检测细胞增殖,用钙离子荧光探针Fluo-3 AM和多功能酶标仪检测细胞内的Ca2+浓度。结果占空比20%的方波波形,频率1 Hz,刺激电压1 V时,细胞吸光度值和细胞内Ca2+浓度与无刺激组相比差异无统计学意义(P>0.05);电压2 V和3 V时细胞吸光度值和细胞内Ca2+浓度与无刺激组相比均有提高(P<0.05),电压3 V时有显著提高(P<0.01);但当电压增大到5 V时抑制细胞增殖,细胞吸光度值与无刺激组相比降低(P<0.01)。结论适宜的电刺激能够提高软骨细胞胞内Ca2+浓度进而促进软骨细胞增殖,其适宜条件为方波波形,占空比20%,频率1 Hz,电压3 V。
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