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[目的]氯丙那林是一种选择性β2-受体激动剂类药物,是国家明令禁止用于所有食品动物促生长的药物之一,对其进行灵敏、快速检测是控制其非法使用的重要手段。本研究的目的是设计合成氯丙那林半抗原、全抗原,制备高亲和力氯丙那林单克隆抗体,并建立可用于检测氯丙那林残留的间接竞争ELISA检测方法。[方法]以2-氯苯甲醛为原料分别合成氯丙那林半抗原CLP-1、CLP-2和CLP-3。通过碳二亚胺法将半抗原分别与钥孔血蓝蛋白（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵白蛋白（OVA）进行偶联,将人工抗原CLP-1/2/3-KLH/BSA免疫雌性Balb/c小鼠,检测血清效价和抑制,使用杂交瘤细胞筛选技术获得细胞株,通过小鼠体内诱生法制备单抗。分别以CLP-1/2/3-BSA/OVA为包被原,优化ELISA条件,建立间接竞争ELISA检测方法。[结果]半抗原CLP-1/2/3经质谱和核磁鉴定,三种半抗原均合成成功,全抗原CLP-1/2/3-BSA经MALDI-TOF鉴定合成成功,CLP-1/2/3-KLH/OVA全抗原经抗体检测鉴定合成成功。小鼠经免疫并筛选,获得单克隆抗体10B10,经鉴定该抗体重链亚型为IgG1,轻链亚型为kappa。ELISA优化结果显示,单克隆抗体最佳稀释倍数为1:100000,最佳包被原为CLP-3-BSA,最佳包被浓度为0.02μg/ml,最佳反应温度为25℃,最佳反应PBS缓冲液盐离子浓度为250mM,抗体对氯丙那林的半数抑制浓度(IC50)为0.068μg/L,R2=0.99898,线性范围为0.026μg/L/L-0.177μg/L/L,对妥布特罗、克伦特罗、溴布特罗、奇帕特罗、莱克多巴胺、马布特罗的交叉反应率为147.8%,1.09%,0.56%,0.36%,0.26%,0.10%。[结论]成功合成了3种氯丙那林新型半抗原,制备出了高亲和力单克隆抗体,可耐受250mM缓冲溶液。建立了快速、灵敏的间接竞争ELISA检测方法,为检测动物源性食品中氯丙那林残留奠定了基础,具有一定的研究价值和应用价值。