【摘 要】
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目的在前期研究基础上,针对AS及其炎症反应的关键细胞成分,观察参莲提取物对脐静脉内皮细胞HUVEC功能的影响及作用机制。方法建立TNFα诱导内皮细胞炎症损伤体外模型,采用激
【基金项目】
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国家直属科研院所技术开发研究专项资金(NCSTE-2007-JKZX-301);重大新药创制综合性中药新药研究开发技术大平台项目(2009 ZX093 01-005-2-4);国家自然基金面上项目(30973901);中国中医科学院自主选题项目(ZZ20090207)
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目的在前期研究基础上,针对AS及其炎症反应的关键细胞成分,观察参莲提取物对脐静脉内皮细胞HUVEC功能的影响及作用机制。方法建立TNFα诱导内皮细胞炎症损伤体外模型,采用激光共聚焦显微镜观察参莲提取物对HUVEC细胞骨架成分和胞浆游离钙的影响。采用Real-time PCR、Western Blotting、信号通路阻断观察参莲提取物对AS主要炎症信号通路的影响。结果 1.参莲提取物各剂量组可显著抑制HUVEC F-actin高表达和胞浆游离钙异常增高。2.参莲提取物可抑制NFκBmRNA和蛋白高表达现象,对PPARγ的mRNA和蛋白表达未见显著影响。NFκB通路阻断剂PDTC可完全逆转参莲提取物对F-actin表达的抑制作用,PPARs通路阻断剂GW9662未见显著影响。3.参莲提取物对NFκB p50炎性表达有明显抑制作用,同时减少IκB蛋白降解,对NFκB DNA结合活性无明显作用。蛋白酶体特异性抑制剂MG132可逆转参莲提取物对F-actin表达的抑制作用,IKK激酶特异性抑制剂Parthenolide无显著影响。结论参莲提取物可有效防止炎性因子诱导下的内皮细胞功能改变,其作用主要与NFκB通路有关,其对IκB的调控主要是影响蛋白酶体对IκB的降解,与IκB蛋白磷酸化活化无关。
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