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[目的意义]:抗菌药物敏感性判定标准(折点)是检测细菌对抗菌药物敏感性,确定耐药水平及耐药率的重要技术标准,目前世界上较权威的制定折点的机构主要有美国临床实验室标准化研究所(CLSI)和欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST),我们国家尚未建立制定折点的机构。安普霉素是畜禽专用抗菌药,在治疗和预防大肠杆菌所引发的疾病中发挥了重要作用,但目前国内外均未建立安普霉素对大肠杆菌的敏感性折点,缺乏判定的统一尺度。本研究参考CLSI建立折点的标准流程与方法,建立安普霉素对猪源大肠杆菌的野生型折点(COWT),并分析了了大肠杆菌对安普霉素耐药与钝化酶之间的相关性,从而为耐安普霉素大肠杆菌的监测与防控提供理论指导。[方法]本研究通过采集我国主要省市规模化养猪场的猪肛门拭子,经实验室培养、分离、纯化和鉴定,获得猪源大肠杆菌临床分离株;采用微量稀释法测定安普霉素对猪源大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),经统计分析,确定安普霉素对猪源大肠杆菌的COWT;采用体外药效学试验方法研究安普霉素对猪源大肠杆菌的最小杀菌浓度(MBC)、最小防突变浓度(MPC)和突变选择窗(MSW)。在测得的MIC (0.5~256 g/mL)范围内挑选出310株不同MIC值的猪源大肠杆菌临床分离株,采用PCR方法检测介导安普霉素耐药性的基因aac(3)-Ⅳ、npmA和apmA。[结果与结论]:共分离得到1222株猪源大肠杆菌临床分离株;通过绘制安普霉素对菌株的MIC值分布直方图,运用统计学方法确定了猪源大肠杆菌对安普霉素的COWT为32μg/mL。MIC50和MIC90分别为16μg/mL和64μg/mL。体外药效学试验表明,安普霉素对猪源大肠杆菌为杀菌型抗菌药(MBC=1~4MIC),突变选择窗较宽。在挑选出310株不同MIC值的猪源大肠杆菌临床分离株中,只检测出aac(3)-Ⅳ钝化酶基因,且主要存在于MIC≥64μg/mL的耐药菌株中,表明aac(3)-Ⅳ钝化酶基因是介导大肠杆菌对安普霉素耐药的主要原因之一。